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Midori Green Advance核酸染料

更新時間:2023-03-14

簡要描述:

MIDORIGreen Advance
MIDORIGreen Advance是傳統核酸染色劑溴化乙錠的安全替代品。 它是一種非致癌性和低致突變性染料,具有很高的靈敏度,可用于檢測瓊脂糖凝膠中的dsDNA,ssDNA和RNA。 MIDORIGreen Advance可以與紫外線或我們創新的藍/綠LED技術結合使用。

Catalogue number: MG04(貨號:MG04)

1 ml MIDORIGreen Advance DNA/RNA stain for in gel or poststaining(1 ml MIDORIGreen Advance DNA / RNA染色劑,用于凝膠或后染色)

Benefits(優點):

  • Perfect in-gel staining of DNA/RNA in agarose gels(瓊脂糖凝膠中DNA / RNA的完美凝膠內染色)
  • No toxicity, non-carcinogenic(無毒,無致癌性)
  • Safe alternative to ethidium bromide(溴化乙錠的安全替代品
  • High fluorescence(高熒光)
  • Optimal for UV-light(優化適合紫外線)

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下一代凝膠內染色

MIDORIGreen Advance是第二代非致癌染料。 經過紫外線或藍/綠光激發后,信號更優化。 它保持了諸如非致癌性和優異的信噪比等優勢。 如圖所示。 1當使用Blue / Green LED技術時,MIDORIGreen Advance比溴乙錠更好。

圖1:使用藍/綠LED透射照明器比較MIDORIGreen Advance(左綠色)和溴化乙錠(右紅色)的靈敏度。


MIDORIGreen Advance即使對于較小的DNA片段也顯示出很高的靈敏度。 MIDORIGreen Advance的稀釋倍數可高達1:25000。 因此,對于100 ml瓊脂糖凝膠染色,4-6μl足夠,導致?17至25升染色的瓊脂糖凝膠。


經驗證的安全性

良好地替代誘變的DNA染色劑溴化乙錠以傳遞強信號是*的。 MIDORIGreen Advance發出的信號強度相當。 但是,不得危及用戶的安全。 因此,使用MIDORIGreen Advance進行了幾次測試,根據這些測試,MIDORIGreen Advance是安全的。

 

染色Protocol:

凝膠內染色
準備100毫升的瓊脂糖凝膠溶液(濃度為0.8-3.0%)并加熱,直到溶液*澄清,看不到小的漂浮顆粒。
在凝膠溶液中加入4-6 µl MIDORIGreen Advance DNA Stain,輕輕混合。將凝膠冷卻至50-60ºC,然后將凝膠澆鑄到凝膠托盤中。當凝膠為固體時,加載樣品并進行電泳。
使用UV或LED照明器檢測波段。黃色或綠色的明膠或玻璃紙濾鏡應用于攝影。


后染
MIDORIGreen Advance DNA Stain后染液可以使用2-3次。
將要重復使用的染色溶液應優選在黑暗中于室溫下保存。
對于<0.5 cm厚的瓊脂糖凝膠,每100 ml緩沖液應使用10-25 µl的污漬。
合適的染色時間(5 – 60分鐘)和污漬的數量可能取決于凝膠的厚度。


注意:不建議將SDS包含在加載緩沖液中使用,因為由污點和SDS相互作用引起的條帶外觀!

 

客戶常見問題解答(FAQ)

問:我可以將Midori Green Advance與脈沖場凝膠電泳(PFGE)一起使用嗎?通常,我使用EtBr進行后期處理。

答:您可以在“Protocol”部分中找到進行后染色的方案。

 

問:您是否有處置Midori Green Advance的詳細信息?我了解該分子對光敏感,我想知道MGA凝膠在使用后是否可以在處置前暴露于光下?

答:MGA無毒,足以將其作為化學實驗室廢物處理。 MGA的發射率會被光破壞,但這并不意味著化學結構會發生變化。但是沒有必要破壞分子,因為它仍然無害。與溴化乙錠相比,這是*的優勢–無需特殊處理。

 

問:為什么不能以相同方式使用MGA和MGD?

答:化學結構*不同。我們測試過將MGD用作MGA,反之亦然。我們不能同時推薦這兩種應用。當您嘗試將MGD用作MGA時,您需要大量MGD和階梯才能獲得可觀察的波段。通過這種方式可以檢測不到低濃度的樣品。 MGD設計用于添加樣品,并且濃縮程度遠低于MGA。以MGA之類的方式使用MGD是非常不經濟的–您需要在凝膠中添加10倍以上的量才能觀察條帶。當您嘗試將MGA用作MGD時,也會出現問題,因為MGA的濃度過高,并且運行方向相反。我試圖降低MGA濃度,在這種情況下,您會看到一些條帶,但它們與所使用的稀釋液無關,非常弱。總結一下,您可以說兩種染料都是針對不同的應用(在凝膠中和添加到樣品中)設計的(具有不同的結構式)和優化的,因此不建議嘗試以其他方式使用它們。

 

問:MGA和MGD有什么區別?這些污漬的穩定性如何?

答:主要區別在于Midori Green Advance(MGA)用于凝膠和后染色(意味著它像溴化乙錠一樣使用),而Midori Green Direct(MGD)直接添加到樣品中。根據凝膠文檔系統的不同,我們建議您使用一種或另一種,但您可以在每種照明器(UV 302、365 nm,藍色照明器和藍色/綠色透射照明器)中同時使用這兩種照明器–只有性能可以提高到合適水平。例如,如果用戶使用UV透照器,我們建議使用MGA,因為使用該色斑的效果非常好。我們的藍/綠色LED儀器和MGD可帶來非常出色的性能-*沒有背景,而且信號強度很高。兩種污漬在室溫下均穩定,因此在室溫下運輸沒有問題,但我們建議將污漬保存在4°C下。

 

問:MGA和MGD是否可以與瓊脂糖和丙烯酰胺凝膠一起使用?

答:我們的客戶給我們反饋說MDG和MGA(染色后)可用于丙烯酰胺凝膠,但主要是為瓊脂糖凝膠設計的。

 

問:如果我將MGA在-20°C下保存6天會怎樣?可以使用嗎?

答:凍結會破壞MGA的功能。您仍然可以嘗試,但我們的經驗使冷凍后的照明失效。

 

問:我在瓊脂糖凝膠中使用Midori Green Advance,為什么在凝膠電泳35分鐘后看不見小條帶,您有什么建議?

答:Midori Green Advance可能帶有電荷,并且與DNA的方向不同,因此凝膠從底部脫色。要查看小樂隊,您可以將運行時間減少到25分鐘。如果您想讓凝膠運行更長的時間,那么您可以*跡。可以使用in凝膠染色,然后縮短后染色時間,或者只對凝膠進行后染色,而無需先進行in凝膠染色。在這兩種情況下,整個凝膠都會被染色,并且觀察到非常低的分子量帶。您也可以使用Midori Green Direct代替Midori Green Advance。該染料會添加到DNA中,因此無論電泳多長時間,每個條帶都會被染色。另一個優點是不存在背景。特別是如果您使用藍色或藍色/綠色LED燈代替紫外線,則會收到令人驚奇的信號。

 

問:在Midori Green Advance數據表上,描述了后期處理多可以使用2-3次。您可以在不損失太多敏感性的情況下使用發布后解決方案多長時間?

答:實際上,我們的客戶使用頻率超過2-3次。如果染色浴始終變暗,您可以在任何情況下使用2-3次而不會降低信號強度。但也可以使用5 – 8次而不會降低信號,具體取決于凝膠的大小和樣品量。如果您檢測到強度降低,則可以增加一點MGA,從而獲得與以前相同的信號強度。

 

問:到期后可以使用MGA嗎?

答:是的,您可以使用它。到期日期只是我們保證的短時間,但通常會持續更長的時間。

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