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ClodronateLiposomes巨噬細胞清除套裝

更新時間(jian):2022-07-28

簡要描述:

脂(zhi)質(zhi)體包括的氯膦酸(suan)二鈉脂(zhi)質(zhi)體和PBS,用于小鼠等動物體外(wai)或者體外(wai)清(qing)除(chu)單核(he)巨噬細胞。ClodronateLiposomes巨噬細胞清(qing)除(chu)套(tao)裝。

ClodronateLiposomes巨噬細胞清除套裝

品牌LIPOSOMA貨號CP-005-005
規格5ml+5ml供貨周期現貨
主要用途

ClodronateLiposomes(氯(lv)膦(lin)酸二鈉脂質體(ti)+PBS對照脂質體(ti))

應用領域生物科研,醫學研究,

產品簡介:

清除(chu)巨噬(shi)細胞(bao)(bao)(depletion of macrophages)是研究巨噬(shi)細胞(bao)(bao)功能的(de)重要方法。荷(he)蘭阿姆斯特丹Vrije University 的(de)Nico van Rooijen教授開(kai)發的(de)一款Clodronate Liposomes,可以利用(yong)巨噬(shi)細胞(bao)(bao)的(de)內(nei)吞機制(zhi),將脂質體包裹(guo)的(de)膜不通(tong)透性的(de)氯磷酸(suan)(clodronate)帶(dai)入(ru)細胞(bao)(bao)內(nei),利用(yong)“特洛(luo)伊木馬機制(zhi)"從而達(da)到(dao)去除(chu)巨噬(shi)細胞(bao)(bao)的(de)目的(de)。

作用原理:

兩(liang)親(qin)性磷(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)分子(zi)在(zai)(zai)水中(zhong)可(ke)以(yi)形(xing)成同心圓形(xing)式(shi)的(de)(de)(de)(de)磷(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)雙分子(zi)層(ceng)球體(ti)(ti),磷(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)雙分子(zi)層(ceng)中(zhong)間通過(guo)水相分隔。溶解在(zai)(zai)水溶液中(zhong)的(de)(de)(de)(de)氯(lv)磷(lin)酸(suan)(suan)鹽(yan)在(zai)(zai)形(xing)成脂(zhi)(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)的(de)(de)(de)(de)過(guo)程(cheng)中(zhong)被(bei)包裹(guo)進磷(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)雙分子(zi)層(ceng)之間的(de)(de)(de)(de)水相中(zhong)(如圖(tu)1)。游離的(de)(de)(de)(de)氯(lv)磷(lin)酸(suan)(suan)鹽(yan)不能自由的(de)(de)(de)(de)通過(guo)脂(zhi)(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)的(de)(de)(de)(de)磷(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)雙分子(zi)層(ceng)。隨(sui)著脂(zhi)(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)被(bei)巨噬細(xi)(xi)胞(bao)吞(tun)噬,在(zai)(zai)巨噬細(xi)(xi)胞(bao)溶酶體(ti)(ti)磷(lin)酸(suan)(suan)酶的(de)(de)(de)(de)作用下,溶解在(zai)(zai)脂(zhi)(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)水相中(zhong)的(de)(de)(de)(de)氯(lv)磷(lin)酸(suan)(suan)鹽(yan)就可(ke)以(yi)被(bei)逐步釋放出來,并累積(ji)在(zai)(zai)細(xi)(xi)胞(bao)內,當其達到一定濃(nong)度(du)時,巨噬細(xi)(xi)胞(bao)將會受到不可(ke)逆轉的(de)(de)(de)(de)損(sun)傷,從而進入(ru)凋(diao)亡過(guo)程(cheng)。從死亡的(de)(de)(de)(de)巨噬細(xi)(xi)胞(bao)中(zhong)釋放出來的(de)(de)(de)(de)氯(lv)磷(lin)酸(suan)(suan)鹽(yan)在(zai)(zai)細(xi)(xi)胞(bao)外的(de)(de)(de)(de)半衰期極(ji)短(大約(yue)15min),可(ke)以(yi)通過(guo)泌(mi)尿(niao)系統排除(chu)體(ti)(ti)外。

CLODRONATE LIPOSOMES & CONTROL LIPOSOMES (PBS)

氯膦酸鹽(yan)脂質體和對照脂質體(PBS)

SKU: CP-005-005

Category: Liposomal formulations

clodronateliposomes脂質體CP-005-005構(gou)成:

氯膦酸鹽脂質體:

由同心磷(lin)脂雙(shuang)層構成(cheng)的(de)人造球,該雙(shuang)層包裹著含有氯膦酸鹽的(de)PBS(磷(lin)酸鹽緩沖(chong)液(ye))水溶液(ye)。脂質體是顆粒,大小大。3微米。它們在PBS中形(xing)成(cheng)懸(xuan)浮(fu)液(ye),在儲存時會(hui)沉(chen)淀(dian)(dian),在試管(guan)或燒瓶的(de)底(di)部(bu)形(xing)成(cheng)沉(chen)淀(dian)(dian)。在對實驗動物給藥之前,應先搖(yao)晃懸(xuan)浮(fu)液(ye),以回收(shou)均(jun)勻的(de)懸(xuan)浮(fu)液(ye)。

對照脂質體(PBS):

對照脂質體(ti)不含(han)氯(lv)(lv)膦酸(suan)鹽。它們僅含(han)有PBS,可用(yong)于對照實驗,以查明(ming)注射氯(lv)(lv)膦酸(suan)鹽脂質體(ti)后觀察到的效果是否僅是由于巨噬細胞耗竭所(suo)致。

clodronateliposomes脂質體CP-005-005產品描(miao)述

磷(lin)脂雙層由磷(lin)脂酰膽堿和膽固醇組成。將所(suo)有脂質體制劑(ji)懸浮在無菌磷(lin)酸鹽緩沖鹽水(PBS)中:

– 10 mM的Na2HPO4;

– 10毫米NaH2PO4;

– 140毫米氯化(hua)鈉。


我們所(suo)有(you)的(de)脂(zhi)質(zhi)體均帶負電荷,因(yin)此不(bu)會一起阻塞(sai)。懸浮液中的(de)脂(zhi)質(zhi)體沒有(you)大小(xiao),這意(yi)味著它(ta)也包含越來越大的(de)脂(zhi)質(zhi)體(大3微(wei)米)。平(ping)均而言,脂(zhi)質(zhi)體的(de)大小(xiao)為(wei)1.7微(wei)米。

氯(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)鹽脂質體(ti)(ti):人工制備的脂質囊泡的懸(xuan)浮液,包裹了氯(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)鹽。懸(xuan)浮液中(zhong)氯(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)鹽的濃度約為(wei)。5毫克(ke)/毫升 氯(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)鹽以CH2Na2Cl2O6P2·5 H2O的形(xing)式封裝在脂質體(ti)(ti)囊泡中(zhong)。

PBS脂質體:人工制備(bei)的脂質囊泡的懸浮液,其中包裹(guo)了PBS水(shui)溶液。這些不含氯膦酸鹽,可(ke)用于對照實驗。

熒光(guang)DiI脂質體:人工制備的脂質囊泡(pao)的懸浮液,其中包封了PBS水溶(rong)液,并(bing)用(yong)熒光(guang)染料DiI標記。它們不含氯膦酸鹽,可用(yong)于研(yan)究(jiu)通過(guo)特定給藥途(tu)徑注射(she)的脂質體是否能夠到(dao)達要(yao)研(yan)究(jiu)的巨噬細(xi)胞。


儲存和使用說明(ming)

到(dao)達脂(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)后,應將(jiang)其儲存在4 – 8oC(或39 – 47oF)之間。脂(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)懸浮(fu)液(ye)不(bu)得冷凍,也不(bu)要暴露于(yu)高(gao)溫下。這可(ke)能(neng)會對磷脂(zhi)(zhi)雙層造成(cheng)干擾,可(ke)能(neng)導(dao)致(zhi)氯膦酸鹽從脂(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)中泄漏出來。

給藥前,首先使脂質(zhi)(zhi)體(ti)達到室(shi)溫,然后輕(qing)輕(qing)搖(yao)動或攪拌懸浮液。一段時間后,脂質(zhi)(zhi)體(ti)易(yi)于沉淀(dian),導(dao)致小(xiao)瓶中的分(fen)布(bu)不均勻。當注射(she)花費太多時間時,脂質(zhi)(zhi)體(ti)甚至可能在注射(she)器中沉淀(dian)。如(ru)果使用同(tong)一注射(she)器注射(she)多只動物,可能會導(dao)致劑量不同(tong)。

不建議稀釋懸浮液,但如有必要,請使(shi)用PBS或鹽水(shui)。

我們建議客(ke)戶在(zai)發(fa)(fa)貨(huo)后16周內使用脂質體(ti)制劑。強烈建議不要在(zai)到期日期之后使用。在(zai)此(ci)期間之后,污染(ran)的風險會(hui)增加,并且(qie)可能會(hui)發(fa)(fa)生輕微的功(gong)能喪失。

作用機理

巨(ju)噬細(xi)(xi)(xi)胞(bao)在免疫(yi)和非(fei)免疫(yi)防御(yu)機(ji)制中起重(zhong)要作用。它們(men)是(shi)抵御(yu)滲透到(dao)脊椎動物體(ti)內(nei)的(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)菌(jun),病毒和其(qi)他(ta)形式(shi)的(de)(de)(de)微生物污染的(de)(de)(de)首道防線。巨(ju)噬細(xi)(xi)(xi)胞(bao)是(shi)大型細(xi)(xi)(xi)胞(bao),幾乎(hu)存在于所有身體(ti)組(zu)織中,它們(men)可(ke)以具有不同(tong)的(de)(de)(de)形式(shi)和名稱(例如(ru)庫普弗細(xi)(xi)(xi)胞(bao),肺(fei)泡巨(ju)噬細(xi)(xi)(xi)胞(bao),小膠質細(xi)(xi)(xi)胞(bao),破骨(gu)細(xi)(xi)(xi)胞(bao),紅髓巨(ju)噬細(xi)(xi)(xi)胞(bao))。巨(ju)噬細(xi)(xi)(xi)胞(bao)“清除",它們(men)攝入(ru)并消化(hua)(hua)可(ke)能是(shi)潛在病原體(ti)的(de)(de)(de)所有異物,微生物,癌細(xi)(xi)(xi)胞(bao)和細(xi)(xi)(xi)胞(bao)碎(sui)片(pian)。該過程稱為吞噬作用。巨(ju)噬細(xi)(xi)(xi)胞(bao)主(zhu)要通過可(ke)溶性分子如(ru)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)因子和趨化(hua)(hua)因子的(de)(de)(de)介導來進(jin)一步調節許多非(fei)吞噬細(xi)(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)(de)功能。他(ta)們(men)參與(yu)先(xian)天免疫(yi),

脂(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)是人工制備的(de)球體(ti)(ti),由同心磷脂(zhi)雙(shuang)層(ceng)組成(cheng)(cheng)。當磷脂(zhi)分(fen)(fen)(fen)散在(zai)(zai)水(shui)(shui)(shui)(shui)中(zhong)時(shi),親水(shui)(shui)(shui)(shui)性頭(tou)部將(jiang)(jiang)構成(cheng)(cheng)脂(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)的(de)兩個外部部分(fen)(fen)(fen),而疏水(shui)(shui)(shui)(shui)性脂(zhi)肪酸(suan)(suan)基團將(jiang)(jiang)構成(cheng)(cheng)內(nei)部部分(fen)(fen)(fen)(見圖1)。水(shui)(shui)(shui)(shui)室分(fen)(fen)(fen)隔(ge)雙(shuang)層(ceng),親水(shui)(shui)(shui)(shui)分(fen)(fen)(fen)子可(ke)以(yi)溶(rong)解在(zai)(zai)其中(zhong),形(xing)成(cheng)(cheng)脂(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)包封的(de)分(fen)(fen)(fen)子。氯(lv)(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)(suan)鹽(yan)(yan)(二氯(lv)(lv)(lv)亞甲(jia)基雙(shuang)膦(lin)(lin)酸(suan)(suan)酯或Cl2MBP)是一(yi)種親水(shui)(shui)(shui)(shui)性分(fen)(fen)(fen)子,可(ke)以(yi)封裝(zhuang)在(zai)(zai)磷脂(zhi)雙(shuang)層(ceng)中(zhong)。游離氯(lv)(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)(suan)鹽(yan)(yan)不(bu)易穿過(guo)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)膜,并(bing)通(tong)過(guo)腎(shen)臟系統(tong)從循環(huan)中(zhong)迅速清除(即數分(fen)(fen)(fen)鐘(zhong)內(nei))。但(dan)是,氯(lv)(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)(suan)鹽(yan)(yan)脂(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)包埋在(zai)(zai)脂(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)中(zhong)時(shi),會被巨(ju)噬細(xi)(xi)胞(bao)(bao)吞(tun)噬,無(wu)法逃脫(見圖2)。磷脂(zhi)雙(shuang)層(ceng)被溶(rong)酶體(ti)(ti)磷脂(zhi)酶消化,而氯(lv)(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)(suan)鹽(yan)(yan)未被消化并(bing)且保(bao)留(liu)在(zai)(zai)巨(ju)噬細(xi)(xi)胞(bao)(bao)中(zhong)。巨(ju)噬細(xi)(xi)胞(bao)(bao)攝入(ru)的(de)磷脂(zhi)雙(shuang)層(ceng)和(he)脂(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)越(yue)多,在(zai)(zai)巨(ju)噬細(xi)(xi)胞(bao)(bao)內(nei)積(ji)累的(de)氯(lv)(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)(suan)鹽(yan)(yan)越(yue)多。超過(guo)一(yi)定的(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)內(nei)濃(nong)度,氯(lv)(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)(suan)鹽(yan)(yan)將(jiang)(jiang)通(tong)過(guo)啟動程序性細(xi)(xi)胞(bao)(bao)死亡(wang)(即凋亡(wang))來消除巨(ju)噬細(xi)(xi)胞(bao)(bao)。

機制氯膦酸鹽脂質體

圖(tu)1.氯膦(lin)酸鹽(yan)脂質體(ti)的(de)(de)示意圖(tu)。囊(nang)泡由同心的(de)(de)磷脂雙層構成(cheng)(cheng),被水(shui)(shui)(shui)性隔室隔開。雙層由親水(shui)(shui)(shui)和疏水(shui)(shui)(shui)基團組(zu)成(cheng)(cheng)。將(jiang)氯膦(lin)酸鹽(yan)(在此以黑(hei)色方塊表示)溶解在水(shui)(shui)(shui)溶液中并封裝在脂質體(ti)內(nei)。


氯膦酸鹽脂質體通過巨噬細胞攝取和消化的示意圖。

圖2.巨噬細(xi)(xi)胞(bao)對氯膦(lin)(lin)(lin)酸鹽脂(zhi)質體的(de)攝取和(he)消化示意圖。巨噬細(xi)(xi)胞(bao)通(tong)過胞(bao)吞(tun)作用攝入氯膦(lin)(lin)(lin)酸鹽脂(zhi)質體,然(ran)后與含(han)有磷脂(zhi)酶的(de)溶酶體(L)融合(箭(jian)頭)。磷脂(zhi)酶破壞(huai)的(de)磷脂(zhi)雙層越(yue)多,在巨噬細(xi)(xi)胞(bao)內釋(shi)放的(de)氯膦(lin)(lin)(lin)酸鹽(黑(hei)色方(fang)塊)越(yue)多。巨噬細(xi)(xi)胞(bao)終通(tong)過凋亡被殺(sha)死。(N =巨噬細(xi)(xi)胞(bao)核(he))。

因此,氯膦(lin)(lin)酸鹽脂(zhi)質(zhi)(zhi)體可用(yong)于通過消耗巨(ju)噬細(xi)胞(bao)(bao)來研究巨(ju)噬細(xi)胞(bao)(bao)功能。例如,它們可以應用(yong)于各種(zhong)自身免疫性疾病(bing),移(yi)植(zhi),神經系統(tong)疾病(bing)和基因治(zhi)療的模型。氯膦(lin)(lin)酸鹽脂(zhi)質(zhi)(zhi)體只(zhi)有在可以達到的情況下才能耗盡巨(ju)噬細(xi)胞(bao)(bao)。一些組織(zhi)可以形成脂(zhi)質(zhi)(zhi)體的屏障(zhang)。通過選擇氯膦(lin)(lin)酸鹽脂(zhi)質(zhi)(zhi)體的正確給藥途徑,可以耗盡特定(ding)的器官或組織(zhi)的巨(ju)噬細(xi)胞(bao)(bao)。有關管理協議(yi)的更多(duo)信息(xi),請(qing)單擊此處。


PBS脂(zhi)質(zhi)體(ti)主要用于對(dui)照實驗。但是(shi),這(zhe)些也(ye)可以在某些時(shi)間段(duan)內通(tong)過飽和來(lai)阻(zu)止吞噬(shi)作用。因(yin)(yin)此(ci),PBS脂(zhi)質(zhi)體(ti)不能代(dai)表(biao)正常健康的,未阻(zu)斷的,未抑制的和未活化的巨噬(shi)細胞的對(dui)照實驗。當比較(jiao)氯膦(lin)酸鹽脂(zhi)質(zhi)體(ti)和PBS脂(zhi)質(zhi)體(ti)的作用時(shi),其作用因(yin)(yin)此(ci)可能小于預期。

有關更(geng)多(duo)信息,請參(can)見:

– Van Rooijen,N.和(he)Sanders,A.(1994)。脂質體介導的巨噬細胞(bao)耗竭:作用(yong)機理,脂質體制備和(he)應用(yong)。免疫學雜志,174(1-2),83-93。

– Van Rooijen,N.,Sanders,A.和van den Berg,TK(1996)。脂(zhi)質體介導(dao)的氯膦酸(suan)鹽(yan)和丙am的細胞內遞(di)送誘導(dao)的巨噬細胞凋亡。免疫學雜志(zhi),193(1),93-99。


ClodronateLiposomes巨噬細胞清除套裝

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