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抗體寡核苷酸偶聯AOC技術的基礎研究應用

更新時間:2022-05-28   點擊次數:557次

藥物開發領域里,寡核苷酸已經廣泛應用于靶向基因治療的研究。自2018年1月起FDA已批準多款產品上市,早期批準的產品以皮下和靜脈內給藥為主,皮下施用的Kynamro利用寡核苷酸在肝臟和腎臟中積累的趨勢;靜脈內給藥的Exondys 51利用杜氏肌營養不良患者肌肉細胞攝取增加的趨勢。


基礎研究中,低豐度蛋白怎樣能進行精確和有效檢測?抗體-寡核苷酸 (Ab-oligo) 偶聯物技術,是一個不錯的選擇,現已被用于從診斷到治療的眾多應用中。Ab-oligo 偶聯物在強化多項生物技術方面發揮著重要作用,這些技術包括免疫學和蛋白質組學研究、生物標志物的發現、臨床診斷(包括即時護理)及其他新型技術。因為寡核苷酸具有多個官能團,所以抗體可以通過氨基酸殘基輕松地與寡核苷酸偶聯,因此適用于大多數體外應用。


抗體-寡核苷酸偶聯物應用

1.免疫聚合酶鏈反應 (immuno-PCR)

與 ELISA 類似,免疫 PCR 也是一項利用抗體檢測和定量混合樣本中特定抗原(分析物) 的強大技術。但是,在免疫 PCR 中,Ab-oligo 偶聯物會與固定分析物結合,然后通過 RT-PCR 使附著的 DNA 擴增。

在免疫 PCR 中使用 Ab–oligo 偶聯物,可以提高蛋白檢測和定量的靈敏度;由于它融合了抗體的檢測特異性RT-PCR 的核酸檢測靈敏度,因此明顯優于一般的 ELISA 法。20 多年來,將免疫檢測與 RT-PCR 進行結合已成為一項標準技術。

由于免疫 PCR 具有強大的擴增能力,而且特異性和靈敏度更高,高出 ELISA 100-10,000 倍,因此檢測的下限更低,擴增產物可以通過凝膠電泳進行觀察,從而確定結合分析物是否存在。

2.多重檢測開發

多重蛋白檢測有助于定量使用通用捕獲技術同時測定多個樣本中的多種目標分析物,從而減少工作流程和樣本量問題。但是,這種檢測方法受到檢測特異性、靈敏度和通量等因素的限制。

開展多重免疫檢測的方法有很多,大致可分為兩類:在固體表面固定,每種分析物在獨立的空間內進行檢測;固定于磁珠或顆粒上,每種分析物在不同的磁珠/顆粒上進行檢測。如今,多重蛋白檢測技術利用 DNA 兩條互補鏈之間的特異性結合,將每種同源物對應的一條鏈(分析物)固定在固體支持物上,例如微量滴定板。將 Ab-oligo 偶聯物合并,并與孔內的特定固定捕獲寡核苷酸雜交,從而創建抗體陣列。


MajicLink oligo-antibody conjugation Kit寡核苷酸偶聯試劑盒的特點和優勢:

-反應迅速、操作簡單,30 分鐘即可激活抗體和寡核苷酸,1 小時即可完成寡核苷酸偶聯,無需具備專業科學知識,省時省力

-清潔程序穩定、靈活(適用于抗體片段和其他蛋白),抗體或者蛋白均可

-抗體和寡核苷酸回收率高,可幫您節省寶貴的試劑

-單向化學,消除了交聯的風險

-共價鍵形成的偶聯物高度穩定

-適用于含 10-120 個堿基對的單鏈寡核苷酸,含多達 80 個堿基對的雙鏈寡核苷酸

-連接化學發生在 5' 端和 3' 端的末端,可以與其他修飾結合


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