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LB自誘導培養基AIM原理知道少

更新時間:2022-02-17   點擊次數:826次

自誘導培養基Auto Induction Medium(AIM),包含LB Broth (AIM), 2x YT Broth (AIM), Terrific Broth (AIM), Super Broth (AIM)。通常,外源蛋白在細菌中表達時常使用IPTG誘導的啟動子,如Lac啟動子。當細胞密度達到理想值時,通過向培養基中加入IPTG的方法誘導蛋白表達。使用這個自動誘導培養基,不再需要監測細胞密度和添加IPTG。葡萄糖作為半乳糖操縱子的阻遏因子阻止細菌利用α-乳糖,而被優先代謝,促進高密度生長。一旦培養基中的葡萄糖被耗盡(通常發生在對數期的后期),乳糖被?-半乳糖苷酶轉換成異乳糖(葡萄糖-1,6-半乳糖),而后者作為IPTG誘導型啟動子的誘導劑,引起乳糖阻遏子從與DNA結合的位點上釋放,啟動重組蛋白的表達。對于DE3基因型的E.coli中,異乳糖使T7lac啟動子去阻遏,并誘導lacUV5啟動子表達T7 RNA聚合酶。通過這種方式,在細菌培養物生長到某一特定點時蛋白表達自發開始,省掉了監測細胞密度(OD600)和添加IPTG這兩個步驟。與傳統IPTG誘導的蛋白表達過程相比,使用自動誘導培養基極大地方便和簡化了試驗流程。

LB培養基是一種培養基的名稱,生化分子實驗中一般用該培養基來預培養菌種,使菌種成倍擴增,達到使用要求。也可用于培養基因工程受體菌(大腸桿菌)。可分為液體培養基和固體培養基。LB一般被解釋為Luria-Bertani培養基,然而根據其發明人貝爾塔尼(Giuseppe Bertani)的說法,這個名字來源于英語的lysogeny broth,即溶菌肉湯。靶點科技常備LB Broth現貨,產品圖片如下:

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自誘導培養基(lac啟動子)(Auto-induction Medium)產品及特點

本產品是在pET專用生長培養基的基礎上開發而成的,它利用E.coli自身對培養 基中碳源和能源的調控利用機制,實現外源蛋白在細菌達到飽和期后的自動誘發。

具有下列特點:

1. 不需添加任何IPTG或相關誘導物,節約成本。--無需IPTG

2. 免去了密切監控菌液密度的過程,尤其適合大規模篩選 。--無需OD監測

3. 細菌生長密度遠高于IPTG誘導表達系統 。--細菌密度高

4. 外源蛋白表達量遠遠高于IPTG誘導表達系統。--表達量高

5. 本產品即開即用,操作簡單 。--溶解即用

6. 與各種細胞培養容器兼容(如培養瓶、培養罐、深孔管、發酵罐等)。--兼容性好


過夜培養自動誘導細胞表達的培養基系統,培養基都可以大程度上提高pET系列和其它IPTG原核誘導表達系統在大腸桿菌中蛋白的表達量,其最大的方便之處在于使用這種培養基不需要對大腸桿菌的生長密度進行檢測。因為IPTG會對細胞存在毒性,因此使用了這種不含IPTG的自動誘導體系培養基與傳統培養基相比可以使細胞數量和目的蛋白量都大大增加數倍。


這種培養基是基于F. William Studier博士的技術,使用了不同代謝成分提高細胞的生長密度,并自動誘導lac啟動子開始轉錄。Overnight Express Instant TB Medium培養基現在提供三種不同的成分。作為一種粉末裝TB培養基它可快速溶解在水中,并進行微波加熱和高壓滅菌處理。

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